تثبيت النيتروجين التكافلي

تثبيت النيتروجين التكافلي
Symbiotic Nitrogen fixation
(بكتريا العقد الجذرية )

يحدث تكافل بين جنس بكتريا الـ Rhizobium ( التي لا تستطيع تثبيت النيتروجين نبات بقولي ) وبعض النباتات البقولية حيث تهاجم البكتريا أنسجة النبات عن طريق الشعيرات الجذرية ثم تكبر في الحجم داخل أنسجة النباتات مكونة عقداً( Nodules ) مميزة تحتوي كل عقدة على أعداد كبيرة من الخلايا الميكروبية , وتكمن أهمية هذه العلاقة التكافلية في تثبيت النيتروجين الجوي , وبكتريا العقد الجذرية عبارة عن عصويات سالبة لصبغة جرام غير متجرثمة هوائية عرضها من 0.5 – 0.9 ملليمكرون .

الأدوات والمواد اللازمة :
1- نبات بقولي يحتوي على عقد جذرية .
2- طبق بتري يحتوي على محلول Calcium Hypochlorite .
3- طبق بتري يحتوي على 4مل ماء معقم .
4- مشارط وملقط معقمة .
5- ماء معقم .
6- صبغة الكريستال البنفسجي .
7- شرائح زجاجية وابر خاصة بالبكتريا .
8- زيت سيدر .

طريقة الصبغ :
1- نفصل العقدة الجذرية عن النبات البقولي
2- نضعه في الطبق البتري الذي يحتوي على المحلول لمدة 5 دقائق .
3- نرفع العقدة بواسطة الملقط المعقم ثم نغسلها عدة مرات بواسطة الماء المعقم .
4- ننقل العقدة إلى الطبق البتري الذي يحتوي على 4مل ماء معقم ثم نهرس العقدة بواسطة إبرة تلقيح ومشرط معقمين .
5- نعمل غشاء ميكروبي من المعلق السابق ثم يترك ليجف بالهواء ونثبت على اللهب .
6- نصبغ الغشاء بالكريستال البنفسجي .
7- نغسل الشريحة بالماء الجاري الخفيف ونجفف .
8- نفحص الغشاء بالعدسة الزيتية بعد وضع نقطة الزيت .
9- ندون المشاهدة .